人正常膀胱上皮细胞（SV-HUC-1）

人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)
细胞介绍：
这株细胞是正常【cháng】输尿【niào】管组织用SV40转【zhuǎn】染建株的。反【fǎn】复用非洲绿猴肾【shèn】细胞平板测【cè】试检测传染性SV40的，结果都【dōu】呈阴【yīn】性。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 F-12K 培养基（GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条件【jiàn】：气相：空气【qì】，95%;二【èr】氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻【dòng】，加入4mL培养基【jī】混合均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液加入【rù】培养瓶中培养过夜【yè】（或将细【xì】胞悬液加入【rù】l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基【jī】，培养【yǎng】过夜）。第二天换液并【bìng】检【jiǎn】查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)对于贴【tiē】壁细胞，传代可参【cān】考以下方法：弃去培养上【shàng】清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细【xì】胞9-21次。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下观【guān】察细胞消【xiāo】化情况【kuàng】，若【ruò】细【xì】胞大部分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操【cāo】作台【tái】，轻敲几【jǐ】下培【péi】养瓶后加少量培养基终【zhōng】止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】 钟，弃【qì】去【qù】上清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细【xì】胞生【shēng】长状态良好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，弃【qì】去培养基后【hòu】加【jiā】入少量【liàng】胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含血清的【de】培养【yǎng】基后加入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发【fā】干净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶【píng】盖【gài】脱落、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物细【xì】胞均【jun1】视为【wéi】有潜【qián】在的生物危害【hài】性，必【bì】须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细胞的器【qì】皿需要灭菌后【hòu】方能丢【diū】弃瓶【píng】中。
 
细胞特性：
1)来源：膀胱
2)形态：上皮细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)运输和【hé】保存：使用含有胎牛血【xuè】清的2ml冻存【cún】管发【fā】送【sòng】存活【huó】细胞。收到【dào】细胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上【shàng】清，加入推荐使【shǐ】用的培养【yǎng】基后转移至l〇cm培【péi】养皿【mǐn】或者【zhě】T25培养瓶中培养【yǎng】，传代【dài】达【dá】到细胞生【shēng】长状态良好时【shí】，再进行冻【dòng】存。具体操【cāo】作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。