人胃癌细胞（SNU216）

人胃癌细胞(SNU216)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八【bā】)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基混合均【jun1】匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加入【rù】培养瓶中培养过夜【yè】（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养【yǎng】基【jī】，培【péi】养过夜【yè】）。第二【èr】天换液并检【jiǎn】查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃癌细胞(SNU216)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上【shàng】清，用不含钙、镁【měi】离子【zǐ】的【de】PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-21分【fèn】钟【zhōng】，然后在显微镜下【xià】观察【chá】细胞消化情况【kuàng】，若细胞【bāo】大部分变圆并脱【tuō】落，迅速【sù】拿回操作【zuò】台【tái】，轻敲几下培养瓶【píng】后加少量培【péi】养基终止消化【huà】。按【àn】6-8ml/瓶补加培【péi】养基【jī】，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的【de】含8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生长【zhǎng】状态良好【hǎo】时，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃【qì】去培养基后【hòu】加入少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清【qīng】的【de】培养基后加入【rù】冻【dòng】存管中【zhōng】，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞【bāo】后，若发现【xiàn】干冰己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞【bāo】有污染，请立【lì】即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞均【jun1】视为有潜在【zài】的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作【zuò】，并请【qǐng】注意【yì】防护，所【suǒ】有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢【diū】弃【qì】瓶中。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃癌细胞(SNU216)运输和保【bǎo】存【cún】：使【shǐ】用含有胎【tāi】牛血【xuè】清【qīng】的2ml冻存【cún】管发【fā】送【sòng】存活细胞。收【shōu】到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心5min后，于洁净【jìng】操作台弃去上【shàng】清，加入【rù】推荐使用的培养基后【hòu】转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培【péi】养，传代达到细胞生长状【zhuàng】态【tài】良好【hǎo】时，再进行冻存【cún】。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。