人骨髓瘤细胞（NCI-H929）

人骨髓瘤细胞(NCI-H929)
细胞介绍：
NCI-H929细胞【bāo】是一【yī】株人【rén】骨【gǔ】髓瘤细胞，主要【yào】用于人骨髓瘤疾病研究等。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛【niú】 血清，10%; 50 y M 2-巯基乙醇。
培养【yǎng】条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的【de】冻存管迅速放入【rù】37°C水浴中【zhōng】（水面要低于冻【dòng】存管盖【gài】部）摇晃【huǎng】解冻，移入事先【xiān】准【zhǔn】备好的含有4mL培养基的15ml离心【xīn】管中混合【hé】均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液，加入lmL培 养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养瓶【píng】中【zhōng】培养【yǎng】过夜。 第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人骨髓瘤细胞(NCI-H929)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法一【yī】：收集细胞，1000RPM，常温条【tiáo】件下离心5分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹句，将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选【xuǎn】择半【bàn】数换液方式，弃去半数培养基后，将剩【shèng】余细胞悬起，将【jiāng】细胞悬液按【àn】1: 2到1: 3的比例【lì】分到新的含【hán】8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中。

 
细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存。悬浮细胞【bāo】冻【dòng】存时【shí】，应将【jiāng】细【xì】胞收集，1000RPM，常【cháng】温条件下离心5分【fèn】钟，少量保存上清液（防止【zhǐ】细【xì】胞【bāo】吸【xī】走)，加入【rù】部【bù】分新鲜培【péi】养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻【dòng】存管 中加入10%DMSO摇匀后进【jìn】行冻存。

 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰【bīng】己【jǐ】挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污【wū】染，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动物【wù】细胞均视为有潜在的生物危【wēi】害性，必须在二【èr】级生物安全台内操作【zuò】，并请注意防【fáng】护【hù】，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：人骨髓
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人骨髓瘤细胞(NCI-H929)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认【rèn】细【xì】胞生长状态，去【qù】掉【diào】封【fēng】口【kǒu】膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长满（90%以上）请【qǐng】及时【shí】进行细胞【bāo】传代，传代培养用【yòng】6ml本【běn】公【gōng】司附带的*培【péi】养基。
5.接【jiē】到细胞次日，请检查细胞是【shì】否污染【rǎn】，若发现污染【rǎn】或疑【yí】似污染，请及时【shí】与我【wǒ】们取得电联。
细胞用途：仅供使用。