人子宫内膜腺癌（转移）细胞 （AN3CA）

人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)
细胞介绍：
AN3CA细胞建系于1964年【nián】。它【tā】衍生【shēng】于子【zǐ】宫内膜癌患者【zhě】淋巴结转移组织，具【jù】有癌 细胞的基本【běn】特性，能在体外【wài】长期传【chuán】代培【péi】养，接种实【shí】验动物产生明显【xiǎn】肿瘤。但细胞的生物学特性及【jí】超微结构尚【shàng】未深入研【yán】究，仅发现该细【xì】胞系【xì】促黑【hēi】激素合成【chéng】为阴性【xìng】。细胞常用于人子宫内膜癌细胞生物学及其【qí】相【xiàng】关特性【xìng】研究。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养基(MEM:GIBCO)，90%;北美【měi】胎【tāi】牛血清(United States，GIBCO，货号【hào】16000-044)，10%。
2.培养条件：气【qì】相【xiàng】：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，补加【jiā】l-2mL培【péi】养基后【hòu】吹匀。然后将【jiāng】所【suǒ】有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培养过夜【yè】（或将 细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换液并检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)对【duì】于贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃【qì】去培【péi】养上清，用不含钙【gài】、镁【měi】离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部 分变圆并【bìng】脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量【liàng】培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加【jiā】入约lml含【hán】血清的培养基【jī】后【hòu】 加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥【huī】发【fā】干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们【men】电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有【yǒu】潜【qián】在的生物危害【hài】性【xìng】，必须在二级生物安【ān】全台内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废液【yè】及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能【néng】丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：子宫内膜
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
  
人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)运输和保存：使用含有胎牛血【xuè】清的2ml冻【dòng】存管发送存【cún】活细胞【bāo】。收到细【xì】胞后， 可在1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于【yú】洁净操【cāo】作台弃去【qù】上清，加入推荐使用【yòng】的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或【huò】者T25培【péi】养瓶中培【péi】养【yǎng】，传代达到细【xì】胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞【bāo】培养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。