大鼠DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各【gè】种试【shì】剂取出放置30分钟，平衡【héng】至室温，所有标准【zhǔn】品和【hé】样品必【bì】需设置平行对照实验，快速加【jiā】入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震荡【dàng】2秒【miǎo】混匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条【tiáo】连同干燥【zào】剂一起放回密封塑料袋【dài】，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合【hé】)孔和【hé】B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至【zhì】各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空【kōng】各微孔，在干净【jìng】的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶【méi】标【biāo】板数次，以确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶【róng】液【yè】，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之【zhī】间好有修正，如果酶【méi】标仪【yí】不能自动【dòng】清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初【chū】次使用【yòng】试剂盒时，应将各【gè】种试剂【jì】管离【lí】心数分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每【měi】次实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加【jiā】任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时【shí】先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试【shì】验时将反应【yīng】板放于铺【pù】有湿布的【de】密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板【bǎn】或者【zhě】试剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工【gōng】作液、辣根【gēn】过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使【shǐ】用，请勿重【chóng】复使用【yòng】已稀释过的【de】标准品、生物【wù】-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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