大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各【gè】种【zhǒng】试剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有标准品和样【yàng】品【pǐn】必需设置平行对【duì】照实【shí】验，快速加入试剂至样品中，立【lì】即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀【yún】。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定酶标条的使用【yòng】量，将【jiāng】剩【shèng】余【yú】的酶标【biāo】条连同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结【jié】合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔置于【yú】孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微孔，在干净的【de】无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以【yǐ】确保没有【yǒu】洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等【děng】体积混合【hé】，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密【mì】度值，在570nm至【zhì】590nm之间好【hǎo】有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣【kòu】除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试【shì】剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集中到管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加【jiā】任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零【líng】。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验【yàn】时将【jiāng】反应板放于铺有湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作液、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液请依据所需的【de】量【liàng】配置使【shǐ】用，请勿【wù】重复【fù】使用已【yǐ】稀【xī】释【shì】过的标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根【gēn】过氧化物酶标【biāo】记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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