大鼠 KAF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 KAF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分【fèn】钟【zhōng】，平衡至【zhì】室温，所有标准品和样品必需设置平【píng】行对照【zhào】实验【yàn】，快【kuài】速加入试【shì】剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸【zhǐ】决定酶标条【tiáo】的使用量，将剩余的酶【méi】标条连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑【sù】料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个微孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作液至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔【kǒng】洗【xǐ】3次，每次需【xū】拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤【dí】，清【qīng】空【kōng】各【gè】微孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底【dǐ】物【wù】溶液，于室【shì】温静置【zhì】5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好【hǎo】有修【xiū】正，如【rú】果酶标仪【yí】不能自动【dòng】清【qīng】除Blank(空白【bái】)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒【hé】时，应【yīng】将【jiāng】各种试剂【jì】管离心数分钟，以便试【shì】剂【jì】集中到管底。

2. 每【měi】次实【shí】验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试【shì】剂，只是zui后加底物溶【róng】液及【jí】2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试【shì】验时将反应【yīng】板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标【biāo】记抗体【tǐ】工【gōng】作【zuò】液、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配【pèi】置【zhì】使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工【gōng】作液或、辣【là】根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 KAF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶【méi】联生物现货供应，包括KAF ELISA试剂盒【hé】、酶联免疫【yì】检【jiǎn】测试剂【jì】盒说明书、实验【yàn】原理、操作步骤等产品详【xiáng】细介绍。