大鼠PIAbIgM ELISA试剂盒(酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠PIAbIgM ELISA试剂盒(酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡至【zhì】室温【wēn】，所有标【biāo】准品和样品必需设置平行对照实验，快【kuài】速加【jiā】入试【shì】剂至【zhì】样品中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘【pán】纸决定酶标【biāo】条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连【lián】同干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微【wēi】孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取50μL 抗体【tǐ】工作液【yè】至各孔中【zhōng】，除【chú】了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振【zhèn】动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各【gè】微孔，在【zài】干净【jìng】的【de】无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次【cì】，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底【dǐ】物A和B需在临用前15分钟【zhōng】内等【děng】体积混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如果酶标仪不能自【zì】动【dòng】清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么【me】手【shǒu】动扣除每个【gè】读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂【jì】盒时，应将各种试剂管离【lí】心数分钟，以便试【shì】剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次【cì】实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺有湿布【bù】的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于9-21℃保【bǎo】存，标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液【yè】、辣根过氧化物【wù】酶【méi】标记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使【shǐ】用已稀释过的标准品、生物-素标【biāo】记抗体工作液或、辣根过氧化【huà】物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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