大鼠 NN-T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 NN-T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前【qián】将各种试【shì】剂【jì】取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室【shì】温，所有【yǒu】标准品和样品必需设置平行对【duì】照实验，快速加【jiā】入试【shì】剂至样品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀【yún】。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的使用量【liàng】，将剩余的酶标条【tiáo】连同干【gàn】燥剂一起放回【huí】密封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室【shì】温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸上【shàng】轻巧酶【méi】标板数次，以确【què】保没【méi】有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显色【sè】底物A和B需在临【lín】用【yòng】前15分钟【zhōng】内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处【chù】的【de】光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好【hǎo】有修正【zhèng】，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试剂盒时，应将各种【zhǒng】试【shì】剂【jì】管离【lí】心数分【fèn】钟，以便试剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白【bái】调零孔，该孔【kǒng】不加任何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用此孔【kǒng】调OD值至【zhì】零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭【bì】盒【hé】内，酶【méi】标【biāo】板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或【huò】者【zhě】试【shì】剂，请于9-21℃保存，标准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化物酶【méi】标记【jì】亲和素【sù】工作液请依据所【suǒ】需【xū】的量【liàng】配置使用，请勿重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标【biāo】准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液或、辣根过氧化【huà】物酶【méi】标【biāo】记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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