大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需【xū】设置【zhì】平【píng】行【háng】对照【zhào】实验，快速加入【rù】试剂至样【yàng】品中，立即【jí】漩涡【wō】震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键【jiàn】盘纸决定【dìng】酶标条的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条连同【tóng】干燥剂【jì】一起【qǐ】放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗【xǐ】3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶【méi】标板数次，以确保没【méi】有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物【wù】溶【róng】液，于【yú】室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等【děng】体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如【rú】果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动【dòng】清【qīng】除Blank(空【kōng】白)孔值，那么【me】手动扣除【chú】每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试【shì】剂管离心数分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不加任何试剂，只是【shì】zui后加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时【shí】先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发【fā】，试验时将反应板放于铺有湿布【bù】的密闭盒内，酶【méi】标【biāo】板【bǎn】加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或者试【shì】剂【jì】，请于【yú】9-20℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液【yè】请依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释【shì】过【guò】的标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体工作液或、辣根【gēn】过氧化物【wù】酶【méi】标记亲【qīn】和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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