大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将各【gè】种试【shì】剂取出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和样【yàng】品必需设置平行【háng】对照【zhào】实【shí】验，快速加入试剂至样品中，立【lì】即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验【yàn】键盘纸决定【dìng】酶标条【tiáo】的使【shǐ】用量，将剩余的【de】酶标条连同干【gàn】燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微【wēi】孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液【yè】至各孔中【zhōng】，除了【le】TA（全【quán】活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于【yú】孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空【kōng】各微孔，在【zài】干净的【de】无尘吸【xī】水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室温静【jìng】置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物【wù】A和B需【xū】在临用【yòng】前【qián】15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白【bái】）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如【rú】果【guǒ】酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣【kòu】除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次【cì】使用试剂盒时，应将【jiāng】各【gè】种试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白【bái】调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶【róng】液及【jí】2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调OD值【zhí】至【zhì】零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸【zhēng】发，试【shì】验时将反应板放于铺有湿【shī】布【bù】的密闭盒内，酶标板加上盖或覆【fù】膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素标记【jì】抗【kàng】体工作液【yè】、辣根过氧【yǎng】化物【wù】酶标记亲和【hé】素工作液请依据【jù】所需【xū】的量配置使用【yòng】，请勿重复【fù】使【shǐ】用【yòng】已稀释【shì】过【guò】的标准品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液或、辣【là】根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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