大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取出【chū】放置30分钟，平衡【héng】至室【shì】温，所【suǒ】有标准品【pǐn】和样品必【bì】需设置【zhì】平行对照实验【yàn】，快速加入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘【pán】纸【zhǐ】决定酶【méi】标条的使用【yòng】量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回【huí】密【mì】封塑【sù】料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于【yú】孔板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各【gè】微孔【kǒng】，在干净【jìng】的无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数【shù】次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等【děng】体积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光【guāng】密度值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有修【xiū】正，如果酶标仪不能自动清除【chú】Blank(空【kōng】白【bái】)孔值，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种【zhǒng】试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中【zhōng】到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白【bái】调【diào】零孔，该孔不加任何试剂，只是【shì】zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体工作液、辣根【gēn】过氧化【huà】物【wù】酶标记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液请依据所需【xū】的【de】量配置使用，请勿【wù】重复使用已【yǐ】稀【xī】释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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