大鼠 TAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 TAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取【qǔ】出【chū】放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需设置平【píng】行【háng】对照实验，快速加入试【shì】剂【jì】至样品【pǐn】中，立即【jí】漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶【méi】标条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连同【tóng】干燥剂【jì】一起放回密封塑【sù】料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和【hé】液至各个微孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔置于孔板【bǎn】振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每【měi】孔【kǒng】洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各【gè】微孔，在【zài】干【gàn】净的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液，于室【shì】温静置【zhì】5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在【zài】临【lín】用【yòng】前15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪【yí】Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不能自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初【chū】次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中【zhōng】到【dào】管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为空白调【diào】零孔，该孔不加任何【hé】试剂【jì】，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸【zhēng】发【fā】，试验【yàn】时将反应板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶【méi】标板【bǎn】或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣【là】根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作【zuò】液请依据所需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释【shì】过的标准品、生【shēng】物【wù】-素标记抗体工【gōng】作液或【huò】、辣根过氧【yǎng】化【huà】物【wù】酶【méi】标记亲【qīn】和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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