大鼠 GP-MM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GP-MM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出【chū】放置【zhì】30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准品和样品【pǐn】必需【xū】设置【zhì】平行对照实【shí】验，快【kuài】速加入试剂至样品【pǐn】中，立即【jí】漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定【dìng】酶标条【tiáo】的使用量，将剩余的酶【méi】标【biāo】条连同干【gàn】燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作【zuò】液至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔【kǒng】内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘【chén】吸【xī】水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确保没有洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需在【zài】临【lín】用前15分钟内【nèi】等体积【jī】混合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修【xiū】正【zhèng】，如果酶标【biāo】仪不能【néng】自动清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值，那么【me】手动扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管离【lí】心数分【fèn】钟，以便【biàn】试【shì】剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空白【bái】调【diào】零孔，该【gāi】孔不加任何试剂【jì】，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发【fā】，试验时将反应板【bǎn】放于【yú】铺有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标【biāo】板或者试【shì】剂【jì】，请【qǐng】于9-21℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使【shǐ】用【yòng】，请勿重复使【shǐ】用已稀【xī】释【shì】过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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