大鼠 GP-II ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GP-II ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将【jiāng】各种【zhǒng】试【shì】剂取出放置30分【fèn】钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需设置平行对【duì】照实验，快速加入试剂至【zhì】样品中，立【lì】即漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实【shí】验【yàn】键盘纸决【jué】定酶【méi】标条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连同干【gàn】燥剂一【yī】起放回密【mì】封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微【wēi】孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次需【xū】拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤【dí】，清空【kōng】各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶标板数次，以确保没【méi】有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前【qián】15分钟内等体积混合，并避光【guāng】放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的【de】光密【mì】度【dù】值【zhí】，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔【kǒng】值，那么手动扣除每【měi】个读数的【de】Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时【shí】，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分钟，以【yǐ】便【biàn】试剂集中到管底。

2. 每次【cì】实【shí】验留一孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时【shí】先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将【jiāng】反应板放【fàng】于【yú】铺有湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或【huò】者试剂，请于9-22℃保存，标准品【pǐn】、生物【wù】-素【sù】标记【jì】抗【kàng】体工【gōng】作液、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素【sù】工作液请依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过【guò】的标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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