大鼠smActininα 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 smActininα 试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂【jì】取出【chū】放置30分【fèn】钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和样【yàng】品必【bì】需【xū】设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩【xuán】涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决【jué】定酶标条的使用量，将剩【shèng】余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂【jì】一起放【fàng】回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时【shí】。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干微【wēi】孔【kǒng】内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各【gè】微孔，在干净【jìng】的无【wú】尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在【zài】临用前15分钟内等【děng】体积混合【hé】，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的【de】光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果酶【méi】标仪不【bú】能【néng】自动清【qīng】除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使【shǐ】用试剂盒时，应将各种试剂管【guǎn】离【lí】心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空白调【diào】零孔，该孔不加【jiā】任【rèn】何【hé】试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反应【yīng】板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿布的密闭【bì】盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量配置使用【yòng】，请勿重【chóng】复【fù】使用已稀释【shì】过【guò】的标【biāo】准品、生【shēng】物-素标记抗体工作【zuò】液【yè】或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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