大鼠 Bid ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Bid ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有标准品和【hé】样品必需设【shè】置平行【háng】对照实验，快【kuài】速【sù】加【jiā】入试剂至样品中，立即漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连同干燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液【yè】至各个【gè】微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板【bǎn】振动【dòng】器上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干微【wēi】孔内溶液，加【jiā】洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一【yī】次【cì】洗涤，清空各微【wēi】孔，在干【gàn】净的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保没有洗涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物【wù】A和【hé】B需【xū】在【zài】临用前15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪【yí】Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果酶标仪不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么【me】手动扣除每个【gè】读【dú】数的【de】Blank（空白【bái】）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒【hé】时，应【yīng】将各种试剂【jì】管离心【xīn】数分钟，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调【diào】OD值至【zhì】零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验【yàn】时将反应【yīng】板放于铺有湿布的【de】密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板或【huò】者【zhě】试剂，请于【yú】9-23℃保【bǎo】存【cún】，标准品、生物【wù】-素标记抗体工作【zuò】液【yè】、辣根过氧化【huà】物酶【méi】标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用，请勿重复【fù】使用已【yǐ】稀释过的【de】标【biāo】准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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