大鼠 GSK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GSK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂【jì】取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有【yǒu】标【biāo】准品和样品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡【dàng】2秒【miǎo】混【hún】匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决定酶标条的【de】使【shǐ】用量【liàng】，将剩余的酶【méi】标【biāo】条连同干【gàn】燥剂一起放回密【mì】封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次【cì】，以【yǐ】确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物【wù】A和【hé】B需在【zài】临用前15分钟内等体积【jī】混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么【me】手【shǒu】动【dòng】扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次【cì】使用试剂盒时，应【yīng】将各【gè】种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液【yè】及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时【shí】将反应板放【fàng】于铺【pù】有湿布的密闭盒【hé】内【nèi】，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标记抗体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使【shǐ】用【yòng】，请勿【wù】重复使用已稀释过的【de】标【biāo】准品、生物-素【sù】标记【jì】抗【kàng】体工作【zuò】液或、辣【là】根过氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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