大鼠α-GST ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠α-GST ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂【jì】取【qǔ】出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温【wēn】，所有标【biāo】准【zhǔn】品和【hé】样【yàng】品必需设置平行对照实验，快速加入试【shì】剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸【zhǐ】决定酶【méi】标条【tiáo】的使用量，将剩余【yú】的酶标【biāo】条连同干燥【zào】剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至【zhì】各个微孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔【kǒng】置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空各微孔，在干净的【de】无尘吸水纸上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有【yǒu】洗涤液【yè】残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底【dǐ】物A和B需在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白【bái】）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标【biāo】仪不能自动清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密【mì】度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离【lí】心【xīn】数分【fèn】钟，以便【biàn】试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样【yàng】品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放【fàng】于【yú】铺有湿布【bù】的【de】密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-23℃保存，标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液【yè】、辣根过氧化物酶【méi】标【biāo】记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的【de】量配置使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标【biāo】准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液或、辣【là】根过氧【yǎng】化物酶标记亲【qīn】和素【sù】工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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