大鼠EMAIgA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠EMAIgA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将【jiāng】各种试剂【jì】取出【chū】放置30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所有标准品【pǐn】和样品必需设置平【píng】行对照实验，快速加入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标条的使用量，将剩余的【de】酶【méi】标条【tiáo】连同干【gàn】燥【zào】剂一起【qǐ】放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一次洗【xǐ】涤【dí】，清空各微孔，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底【dǐ】物【wù】A和B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合，并【bìng】避光放【fàng】置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在【zài】570nm至【zhì】590nm之间好有修【xiū】正，如果酶标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那【nà】么手【shǒu】动扣除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试【shì】剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心数分【fèn】钟，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实验【yàn】留一孔作【zuò】为空白调零【líng】孔，该孔不【bú】加任何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验【yàn】时【shí】将反应板放于铺有湿【shī】布的密【mì】闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶【méi】标板或者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生【shēng】物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液、辣根过【guò】氧化物酶【méi】标【biāo】记亲【qīn】和【hé】素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用【yòng】，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标记【jì】抗【kàng】体工作【zuò】液或、辣根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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