鸡皮刺螨PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：鸡皮刺螨PCR检测试剂盒

英文名称：Dermanyssus gallinaePCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫升【shēng】

染【rǎn】色液（t B）                                 微升

稀释液【yè】（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                  毫升【shēng】

产品说明书【shū】                                     1份【fèn】

注意事项：

1．基础程序；

2．扩增温度和延伸温度；

3．反应时间；

4．循环次数；

5．PCR 反应液的配制；

6．PCR技术的基本原理；

7．PCR的反应动力学；

8．PCR扩增产物；

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种【zhǒng】即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，鸡皮刺螨PCR检测试剂盒PCR 产【chǎn】物【wù】的特异性取决于引物【wù】与模【mó】板DNA互补的程度【dù】。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列【liè】， 就能【néng】按其设计互补的寡【guǎ】核苷酸链做引【yǐn】物，利用PCR就可【kě】将【jiāng】模板【bǎn】DNA在【zài】体【tǐ】外大量扩增。设计引【yǐn】物应遵循以下【xià】原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为【wéi】宜，特定条【tiáo】件下可【kě】扩增长至【zhì】10kb的片段【duàn】。

③引物碱基【jī】：G+C含量以9-22%为宜，G+C太少【shǎo】扩【kuò】增效果不佳，G+C过多易出【chū】现非特【tè】异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上【shàng】的嘌呤或【huò】嘧啶核苷【gān】酸的成串排列【liè】。

④避【bì】免【miǎn】引物【wù】内部【bù】出【chū】现二级结构，避免【miǎn】两条引物间互补，特别【bié】是【shì】3'端的【de】互补，否则会形成引物二聚【jù】体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端【duān】的碱基，特别【bié】是末及倒数【shù】第二个碱基，应严格要求配对，以避【bì】免因末【mò】端碱【jiǎn】基不配对而【ér】导致PCR失败。

⑥引物【wù】中有或能加上【shàng】合【hé】适的酶切位【wèi】点， 被扩增的靶序列【liè】*有适宜【yí】的酶【méi】切位点， 这对酶切【qiē】分析或分子【zǐ】克隆很有好处。

⑦引物的特【tè】异性【xìng】：引【yǐn】物应与核酸序列数据库的其它序列无【wú】明显同源性。

引【yǐn】物量：每【měi】条【tiáo】引物的浓【nóng】度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物【wù】量【liàng】产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非【fēi】特异性扩【kuò】增，且可增加引【yǐn】物之间形成二【èr】聚体的机【jī】会。