鸡贫血病毒PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：鸡贫血病毒PCR检测试剂盒

英文名称：Chicken Anemia Virus（CAV）PCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染【rǎn】色液（t B）                                  微升【shēng】

鸡稀【xī】释液（C）                                  毫升

溶解【jiě】液（tD）                                   毫升

产品说【shuō】明书                                      1份【fèn】

注意事项：

1．基础程序；

2．扩增温度和延伸温度；

3．反应时间；

4．循环次数；

5．PCR 反应液的配制；

6．PCR技术的基本原理；

7．PCR的反应动力学；

8．PCR扩增产物；

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的物【wù】质主【zhǔ】要有五种即【jí】引【yǐn】物、酶【méi】、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，鸡贫血病毒PCR检测试剂盒PCR 产物的特异【yì】性取【qǔ】决于引物与【yǔ】模板DNA互补的程度【dù】。理论上，只要知道任【rèn】何一段模【mó】板DNA序列， 就能按其设计互【hù】补的寡核【hé】苷【gān】酸链做引物，利用PCR就【jiù】可将模板DNA在体外大量扩【kuò】增。设【shè】计【jì】引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩【kuò】增跨度： 以200-500bp为【wéi】宜，特定【dìng】条件【jiàn】下可扩增长至【zhì】10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以9-22%为宜，G+C太少扩增效果【guǒ】不佳，G+C过多【duō】易【yì】出现非【fēi】特异【yì】条带。ATGC*随【suí】机分布【bù】，避【bì】免5个以【yǐ】上的【de】嘌【piào】呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免【miǎn】引【yǐn】物内部出现二级结构，避免两条引【yǐn】物间互补，特别是【shì】3'端【duān】的互补，否则会【huì】形成引物二聚体，产【chǎn】生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的【de】碱基，特别【bié】是末及倒数第二个碱基【jī】，应严格要求配对【duì】，以避【bì】免因末端碱【jiǎn】基【jī】不配对【duì】而导致PCR失【shī】败。

⑥引物中【zhōng】有或能加上合适的【de】酶切【qiē】位【wèi】点， 被扩【kuò】增的靶序【xù】列【liè】*有适宜的酶切位点， 这对【duì】酶切分析或分子克隆【lóng】很有好处【chù】。

⑦引物的【de】特异性：引物应与核【hé】酸【suān】序列数据库的其它序列无【wú】明显同源性【xìng】。

引物量：每条引物的浓【nóng】度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生【shēng】所需要的结果为好【hǎo】，引【yǐn】物浓【nóng】度偏高会引起错配和非【fēi】特异性【xìng】扩增，且可增【zēng】加引物之间形【xíng】成二聚体的机会。