绵羊鞭虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：绵羊鞭虫PCR检测试剂盒

英文名称：Trichuris ovisPCR

准备物品：

清【qīng】理【lǐ】液（A）                                   毫升

染色液【yè】（t B）                                 微升

稀【xī】释液（C）                                   毫升

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品说明【míng】书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的【de】物质主要有五种即引【yǐn】物【wù】、酶、dNTP、模板【bǎn】和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，绵羊鞭虫PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取决【jué】于引物与模板DNA互【hù】补【bǔ】的程度。理【lǐ】论【lùn】上，只要知道任【rèn】何一段模板DNA序列【liè】， 就能按其设计互补的寡【guǎ】核苷酸链做引【yǐn】物【wù】，利用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外大量扩【kuò】增。设计引【yǐn】物应遵【zūn】循以下原则【zé】：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为【wéi】宜，特【tè】定条件【jiàn】下【xià】可扩【kuò】增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量【liàng】以9-21%为宜，G+C太【tài】少扩【kuò】增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随【suí】机分布，避【bì】免5个以上的嘌呤或嘧啶【dìng】核苷酸的【de】成【chéng】串排列。

④避免【miǎn】引物内部出【chū】现【xiàn】二级结构【gòu】，避免两条引物间【jiān】互补【bǔ】，特别是3'端【duān】的互补，否【fǒu】则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端【duān】的【de】碱基，特别是末及倒【dǎo】数第【dì】二个碱基，应严格要求配对，以避免因末【mò】端碱基【jī】不【bú】配对而【ér】导致PCR失败【bài】。

⑥引物【wù】中有或能加上合【hé】适的酶【méi】切位点， 被扩增的靶序【xù】列【liè】*有【yǒu】适宜【yí】的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很【hěn】有好处。

⑦引物的特【tè】异性：引物应与核酸【suān】序列【liè】数据库的其它序列无【wú】明【míng】显同源【yuán】性。

引物量：每条【tiáo】引物的浓度0.1～1umol或【huò】10～100pmol，以【yǐ】*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度【dù】偏高会引起错配和非特异【yì】性【xìng】扩增【zēng】，且可增加【jiā】引物之间形成二【èr】聚体的机【jī】会【huì】。