绵羊痘病毒PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：绵羊痘病毒PCR检测试剂盒

英文名称：Sheeppox Virus(SPPV)PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标【biāo】准品【pǐn】（冻【dòng】干品）： 2瓶，请临用前【qián】15分钟内配制【zhì】。每瓶【píng】以样品【pǐn】稀【xī】释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约【yuē】10分【fèn】钟，同时【shí】反复颠倒【dǎo】/搓【cuō】动【dòng】以助溶解，其浓度为【wéi】200 U/L，然后做系【xì】列倍比稀释（注：不要直接在板中进【jìn】行倍比稀释），分【fèn】别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀【xī】释液直【zhí】接作为【wéi】空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于【yú】0.3ml ）200 U/L的上述标【biāo】准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中【zhōng】，混【hún】匀即可，其【qí】余【yú】浓度以【yǐ】此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、绵羊痘病毒PCR检测试剂盒存放【fàng】：样本【běn】在2~8℃条【tiáo】件下保存应不超【chāo】过72h，-70℃以【yǐ】下可长期保【bǎo】存，但应避免反复冻融（zui多冻融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性【xìng】：所有产品使【shǐ】用的引物均经过详【xiáng】尽的生物信息【xī】学分析，经【jīng】过GenBank及自【zì】建【jiàn】庞【páng】大数据库的比对，确保所【suǒ】用的每【měi】一条引物均为种属或血清型特异【yì】的基因序【xù】列区段【duàn】，可实现对种属及血清型的特【tè】异【yì】检测，特异性【xìng】均达到100%。

2.重现性：该【gāi】系列所有产品均【jun1】经过【guò】大量实验【yàn】菌株的验证，重现性为100%。

3.灵敏性：该【gāi】系列产品【pǐn】可【kě】实现对检测菌的【de】高灵敏【mǐn】检测，当样品中的【de】浓度达到【dào】103cfu/ml时，可实现对其的直【zhí】接检测，无需【xū】繁【fán】琐的增菌过【guò】程。

4.实用性：检测范【fàn】围【wéi】广，涵盖了对人体【tǐ】危害较【jiào】为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可【kě】实现【xiàn】对临床样品及其他环境取样的快速检【jiǎn】测，整个检测过【guò】程为9-21个小时【shí】。

5.优势1：序列资源丰富，除GenBank公布【bù】的【de】序【xù】列【liè】外，公司还进行了大量【liàng】菌株的序列【liè】破译【yì】，从【cóng】理论上保证所选引物具有良好【hǎo】的保守性【xìng】和特【tè】异性。

 6.优势2：该系【xì】列试剂【jì】盒均经过大量【liàng】的保守性及特异性实验验证，凭借【jiè】公司拥有【yǒu】的【de】丰富的菌种资源【yuán】，每一种【zhǒng】检测试剂【jì】盒均经过【guò】了20余【yú】种标准菌株【zhū】和临床菌株的保守性验【yàn】证及40余种近缘标准菌【jun1】株和【hé】临床菌株的【de】特异性验证，确保在使【shǐ】用过程中不【bú】会【huì】出现任【rèn】何的假阳性及假阴性报告结果【guǒ】。

使用方法：

注：所有试剂使【shǐ】用【yòng】前需*解冻，混合【hé】均匀，6,000rpm离心数秒后【hòu】使用【yòng】。

1. 样本处理（样本处理区）

待【dài】检样本的【de】核酸提取可采用病【bìng】毒RNA提取试剂盒或自动化核【hé】酸提取仪【yí】等，具【jù】体【tǐ】提取方法【fǎ】请参照【zhào】相关说明书。阳性质控品及阴【yīn】性质控品无需提取，可直接使【shǐ】用【yòng】。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性【xìng】质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管【guǎn】分【fèn】别加入FMD RT-PCR反应【yīng】液【yè】19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反【fǎn】应【yīng】液、RT-PCR酶所需总【zǒng】量，两【liǎng】者【zhě】混匀离心后分装20 μl至单个【gè】PCR反应管)。组分每头份用量【liàng】FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有【yǒu】PCR反【fǎn】应管于6,000rpm离心30s，转移【yí】至【zhì】样本处理区。

2.绵羊痘病毒PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提【tí】取物、阴性质控品和阳性质【zhì】控品各【gè】5 μl，盖紧管【guǎn】盖，于6,000rpm离【lí】心10s，转移至扩增【zēng】区【qū】。