泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

英文名【míng】称：Uropathogenic Escherichia coli（UPEC）PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分【fèn】钟内【nèi】配制【zhì】。每瓶以【yǐ】样【yàng】品稀释液稀【xī】释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反【fǎn】复颠倒/搓动以助溶【róng】解，其【qí】浓度为200 U/L，然后做系【xì】列【liè】倍比【bǐ】稀释（注：不【bú】要直【zhí】接在板【bǎn】中进行倍比稀释【shì】），分别配制成【chéng】200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀【xī】释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制【zhì】100 U/L标准品：取0.3ml （不要少【shǎo】于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释【shì】液的Eppendorf管【guǎn】中，混匀即可，其余【yú】浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒存放：样本在2~8℃条件【jiàn】下保存应【yīng】不超过72h，-70℃以下可长期【qī】保存，但应避【bì】免反复【fù】冻融【róng】（zui多冻【dòng】融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有产品使用的【de】引物均经过【guò】详尽【jìn】的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞【páng】大数据库的比对，确保所用的【de】每【měi】一条引物均为种属或血清【qīng】型【xíng】特【tè】异的【de】基因【yīn】序【xù】列区段，可【kě】实现对种属及血清型的【de】特异检测，特【tè】异性均达到【dào】100%。

2.重现性【xìng】：该系【xì】列所有产品均【jun1】经过大量实验菌株的验证，重现【xiàn】性【xìng】为100%。

3.灵敏性：该系列产品可实【shí】现对检【jiǎn】测菌的高【gāo】灵敏检测，当样【yàng】品中的【de】浓【nóng】度达到103cfu/ml时，可【kě】实【shí】现对其【qí】的直接【jiē】检测【cè】，无需繁琐的增菌过程。

4.实【shí】用性：检测【cè】范围广，涵【hán】盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实【shí】现【xiàn】对临床样品及其他环境【jìng】取样的快【kuài】速检测，整个检测过【guò】程【chéng】为9-20个【gè】小时。

5.优【yōu】势1：序列资源丰富，除GenBank公布【bù】的【de】序列外，公司还进行了大量菌株的【de】序列破【pò】译，从理论上保证所选引物具【jù】有良好的【de】保【bǎo】守【shǒu】性和特异性。

6.优势2：该【gāi】系【xì】列【liè】试【shì】剂盒【hé】均经过大量的保守性【xìng】及特异性实验验证，凭借公【gōng】司拥有的丰富的菌种资源，每【měi】一种【zhǒng】检测试【shì】剂盒【hé】均经【jīng】过了20余种标准菌株【zhū】和【hé】临床【chuáng】菌株的保守性验【yàn】证及40余种近缘标【biāo】准菌株和【hé】临床菌株【zhū】的特异性验证，确保在使用过程中不【bú】会出现任何的假阳性及假阴性报告结【jié】果。

使用方法：

注：所【suǒ】有试剂使用前需*解冻【dòng】，混合均匀，6,000rpm离心数【shù】秒后【hòu】使用【yòng】。

1. 样本处理（样本处理区）

待【dài】检【jiǎn】样【yàng】本的核酸【suān】提取【qǔ】可采用病【bìng】毒RNA提【tí】取【qǔ】试剂盒或自【zì】动化核酸提取仪【yí】等，具体【tǐ】提取方法请参照【zhào】相关说明书。阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品【pǐn】+待检样本+阳性【xìng】质控【kòng】品）PCR反应管【guǎn】，每管分别加入FMD RT-PCR反应液【yè】19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份【fèn】用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液【yè】、RT-PCR酶【méi】所需总【zǒng】量【liàng】，两者混匀离心后分装20 μl至单个【gè】PCR反应管【guǎn】)。组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所【suǒ】有PCR反【fǎn】应【yīng】管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在【zài】上述的PCR反应管中分别加【jiā】入待检样本RNA提取物、阴【yīn】性质控品和阳性质控品【pǐn】各5 μl，盖紧【jǐn】管盖，于6,000rpm离心【xīn】10s，转移【yí】至扩增区【qū】。