小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞（G422）

小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)
细胞介绍
1964年建株；甲基胆蒽植入Km小鼠【shǔ】脑内【nèi】诱发星【xīng】形细胞瘤，传至第120代后【hòu】转为【wéi】
胶质细胞瘤；瘤细胞【bāo】悬液【yè】同系小鼠皮下、肌肉、脑内移植【zhí】，成功率皆100%。肌肉及脑内移植可形成较【jiào】规【guī】律的移植性【xìng】瘤株【zhū】，存【cún】活时【shí】间【jiān】脑内型15.9±4.8天；肌肉型20.3±6.6天。
 
细胞特性
1)来源：星形细胞瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下【xià】确认细胞生长状态【tài】，去【qù】掉封口膜并【bìng】将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进【jìn】行细胞传代，传代培养用6ml本公【gōng】司附【fù】 带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若发现【xiàn】污染【rǎn】或疑似【sì】污染，请【qǐng】及时【shí】与我 们取得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛【niú】血清，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳【tàn】，5%。温度【dù】：37°C，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞【bāo】：将含有【yǒu】lmL细胞悬液【yè】的【de】冻存管迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低于冻存管盖【gài】部）摇【yáo】晃解冻，移入【rù】事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合【hé】均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，加入【rù】lmL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然【rán】后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬液移入含【hán】有【yǒu】5ml培养基的培养瓶【píng】中培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-23次。
力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶【píng】中，置于37°C培
养箱中消化9-23分钟，然【rán】后在显微镜下观察【chá】细胞【bāo】消化情况，若【ruò】细胞大【dà】部分变圆并【bìng】脱落，迅速【sù】拿回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】入【rù】3ml此细胞的【de】 培养基终止消化。
 轻轻吹【chuī】打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培【péi】养液后【hòu】吹匀。
移入到事先准备好的【de】含有5ml培养基的【de】T-25培养瓶【píng】中【zhōng】或含有【yǒu】14ml培【péi】养【yǎng】基的T-75培养瓶中培养。
细胞冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻【dòng】存时，先要消化处理【lǐ】并进行细胞计数。消化【huà】方法【fǎ】按【àn】照细胞传【chuán】代方法的9-23步骤进行，后【hòu】的重悬液使用血清。悬浮【fú】细胞【bāo】直【zhí】接计数后离心，用血清重悬浮【fú】，加DMSO至终浓度【dù】为10%。加入【rù】DMSO后迅速【sù】混匀，按每lml的数量分配到冻存管 中【zhōng】。本公司按每个冻【dòng】存【cún】管细胞数目大于1X106个细【xì】胞【bāo】冻存。
 
小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥发干净【jìng】、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请立即与【yǔ】我们电联【lián】。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的生物危【wēi】害性，必【bì】须在二级生物安全台内操作【zuò】，并请注意防护【hù】，所有废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后方【fāng】能【néng】丢弃【qì】。