小鼠结肠癌细胞 （CT26）

小鼠结肠癌细胞 (CT26)
细胞特性
1)来源：小鼠结肠癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在【zài】显微镜下确认细胞生长状态【tài】，去【qù】掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长满（90%以【yǐ】上）请及时【shí】进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附 带【dài】的*培【péi】养基。
5.接【jiē】到细胞【bāo】次日，请检【jiǎn】查细【xì】胞是否污染，若【ruò】发现污染或疑似污【wū】染，请及【jí】时与我 们取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠结肠癌细胞 (CT26)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备RPIVM-1640培养【yǎng】基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培【péi】养【yǎng】条件：气相：空气【qì】，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养【yǎng】箱湿度 为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬【xuán】液的冻存【cún】管迅速放入37°C水【shuǐ】浴中（水面【miàn】要低 于冻存管盖部）摇晃解冻，移【yí】入事先准备好的含【hán】有【yǒu】4mL培养基【jī】的15ml离心 管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，加入【rù】lmL培 养【yǎng】基【jī】后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液【yè】移入含【hán】有5ml培养基的【de】培养瓶中培养过夜【yè】。 第二天换液并检查细胞【bāo】密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-24次。
力口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶【píng】中，置于37°C培养箱中【zhōng】消化9-24分钟，然后在显微镜下观察细【xì】胞消化情况，若【ruò】细【xì】胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加入3ml此细胞的【de】培【péi】养基终【zhōng】止消化。
轻轻【qīng】吹打后吸出【chū】，移入【rù】15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液【yè】，加入lmL培【péi】养液后吹匀【yún】。
移入【rù】到事【shì】先准备好的含有5ml培养基【jī】的T-25培养瓶中或含有14ml培养 基【jī】的T-75培【péi】养【yǎng】瓶中培养。
 
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻存【cún】。贴【tiē】壁细胞冻存时，先要【yào】消化处理并进行细胞计数。消化方【fāng】法按照【zhào】细胞传代方法的9-24步骤进行，后【hòu】的重【chóng】悬液【yè】使用血【xuè】清。悬浮【fú】细胞直接计【jì】数后【hòu】离心，用血清重悬【xuán】浮，加【jiā】DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀【yún】，按【àn】每【měi】lml的数量分配到冻存【cún】管 中。本公司按每个冻存管细【xì】胞数目大于【yú】1X106个细胞冻存。
 
小鼠结肠癌细胞 (CT26)注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰己挥发【fā】干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜在的生物危害性，必须【xū】在二【èr】级生【shēng】物安【ān】全台内操作，并请注【zhù】意【yì】防护【hù】，所有【yǒu】废液及接触过此细胞的器皿需要【yào】灭【miè】菌后方能丢【diū】弃。