小鼠小胶质细胞 （BV2）

小鼠小胶质细胞 (BV2)
细胞介绍
该细胞来【lái】源于德【dé】国DSMZ (Germancollectionofmicroorganismsandcellcultures)，采集【jí】于小【xiǎo】鼠脑小胶质细胞【bāo】瘤。
 
细胞特性
1)来源：小鼠脑
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使【shǐ】用含有胎【tāi】牛血清【qīng】的2ml冻存管发送存活细胞。收【shōu】到细胞后，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离【lí】心【xīn】5min后，于洁【jié】净操作台弃去上【shàng】清，加【jiā】入【rù】推荐使用的培养基【jī】后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者【zhě】T25培【péi】养【yǎng】瓶中培【péi】养【yǎng】，传代达到细胞生长状态良好时【shí】，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠小胶质细胞 (BV2)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBC0)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养基混合【hé】均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬液【yè】加入【rù】培养【yǎng】瓶中培养过夜【yè】（或【huò】将细【xì】胞【bāo】悬液加入l〇cm皿【mǐn】中【zhōng】，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-24次。
力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养【yǎng】箱中消化9-24分钟，然后在显微镜下观察细胞消化【huà】情况，若细胞大部分变圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速拿【ná】回操作【zuò】台，轻敲几下培【péi】养【yǎng】瓶后【hòu】加少量【liàng】培养基终【zhōng】止【zhǐ】 消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条【tiáo】件下离【lí】心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去【qù】上清液，补加【jiā】l-2mL培【péi】养液后【hòu】吹匀。
 
将细胞【bāo】悬【xuán】液按1: 2到1: 5的【de】比例分到【dào】新的含【hán】8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行【háng】细胞【bāo】冻存。贴壁【bì】细【xì】胞冻存时，弃 去培养基后【hòu】加入少【shǎo】量胰酶，细胞变圆【yuán】脱【tuō】落后，加入【rù】约【yuē】lml含血清的【de】培养基【jī】后加入冻存【cún】管中，再【zài】添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。
 
小鼠小胶质细胞 (BV2)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破【pò】损【sǔn】及细胞【bāo】有【yǒu】污染，请立即与我们电联【lián】。
所有【yǒu】动物细胞均视为【wéi】有潜在的【de】生物危害性，必【bì】须在【zài】二级生物安全台【tái】内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方【fāng】能丢弃。