小鼠软骨祖细胞 （ATDC5）

小鼠软骨祖细胞 (ATDC5)
细胞介绍
ATDC5细胞是来源于【yú】畸胎瘤细胞【bāo】的小【xiǎo】鼠软骨发生【shēng】细胞系，在胰岛【dǎo】素刺激下，分化【huà】成软骨细胞，形成软骨小【xiǎo】结，表【biǎo】达II型胶原【yuán】和X型胶原后发生【shēng】矿化，反映软【ruǎn】骨发生过程。
 
细胞特性
1)来源：小鼠软骨
2)形态：多角形，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者【zhě】lmL冻【dòng】存管包装运输和保存：使用T25瓶充【chōng】液发送活细胞。收到细【xì】胞后【hòu】，请先在显微镜下检查细胞【bāo】生长状态，并将【jiāng】T25瓶置于【yú】培【péi】养箱【xiāng】约6h或过夜后，再次检查细胞状态。若【ruò】状态良好，可按照【zhào】以下细【xì】胞培【péi】养【yǎng】步骤进【jìn】行【háng】细胞【bāo】后续处理【lǐ】操【cāo】作【zuò】。若发现可疑【yí】污染物【wù】，请及时与我们取得电联。
 
小鼠软骨祖细胞 (ATDC5)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM 培养【yǎng】基(DMEM，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度【dù】，培养箱【xiāng】湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液氮储存。
2)细【xì】胞处【chù】理：复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃解冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养基后【hòu】吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜【yè】（或【huò】将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基，培养过夜）。第二天换液并检【jiǎn】查细胞密【mì】度。细胞【bāo】传代【dài】：如【rú】果细胞密度达80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-24次。 力【lì】口【kǒu】 2m丨【shù】消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消化9-24分钟，然后在【zài】显【xiǎn】微镜下【xià】观察细胞【bāo】消化情况，若【ruò】细【xì】胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速拿回【huí】操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀【yún】后吸【xī】出，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分 钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生长状态良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻存。贴壁细【xì】胞【bāo】冻存时，弃去培养基后加入【rù】少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加【jiā】入【rù】约【yuē】lml含血清的培【péi】养基后加入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
小鼠软骨祖细胞 (ATDC5)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰【bīng】己挥【huī】发干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖脱落【luò】、破【pò】损及细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的【de】生【shēng】物危【wēi】害性，必须在【zài】二级【jí】生物【wù】安全台内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废液及接触过此【cǐ】细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】。