人肾透明细胞腺癌细胞 （786-0）

人肾透明细胞腺癌细胞 (786-0)
细胞介绍：
此【cǐ】细胞源自一个原发性透明细【xì】胞癌。此细胞有【yǒu】微绒毛和桥粒，能【néng】在软琼脂是生【shēng】长。 此细胞【bāo】的一个PTH样的多【duō】肽与乳癌和【hé】肺癌【ái】中的【de】肽相似。这个多【duō】肽的N端与 PTH相似，活性与【yǔ】PTH相似，分子量为【wéi】6000道【dào】尔【ěr】顿。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,北美胎牛【niú】血清【qīng】 (United States, GIBCO)，10%;双抗 1%。
2. 培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】箱【xiāng】湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理
1.复苏细胞【bāo】：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加 入【rù】4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液【yè】加入培【péi】养瓶中培【péi】养【yǎng】过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天换【huàn】液并检查细胞密度。
2.细胞【bāo】传代【dài】：如果【guǒ】细胞密度达80%-90%，即可进行【háng】传代培养。
 
人肾透明细胞腺癌细胞 (786-0)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不【bú】含钙、镁离【lí】子【zǐ】的PBS润洗【xǐ】细胞9-19次。力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中【zhōng】消化9-19分钟【zhōng】，然【rán】后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大【dà】部【bù】分【fèn】变圆并脱【tuō】落，迅速拿回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】少量培【péi】养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的【de】含8ml培养基【jī】的【de】新【xīn】皿【mǐn】中或者瓶中。
3.细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
 
下面T25瓶为例；
细胞冻存【cún】时，弃去【qù】培养基后【hòu】，PBS清洗瓶底【dǐ】9-19次后加入lml胰酶，细【xì】胞变圆脱落后，加入2ml*培养基终止消化，可使用血球计【jì】数板计【jì】数。1000RPM离心5分钟【zhōng】去掉【diào】上清【qīng】。用【yòng】血清重悬浮【fú】，加DMSO至终浓度为 10%。加【jiā】入DMSO后迅速混匀，按每【měi】lml的数量分配到【dào】冻存管中，注意冻存管做好标【biāo】识。本【běn】公司按每个【gè】冻【dòng】存管【guǎn】细胞数目大【dà】于1X106个细【xì】胞冻存【cún】。将冻存管置【zhì】于程序降温盒中，放入-80度冰箱【xiāng】，至少2个小时以后转入【rù】液氮灌【guàn】储存。记录冻存管【guǎn】位置【zhì】以便下次拿取【qǔ】。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干【gàn】净、冻存【cún】管瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有【yǒu】潜【qián】在的生物危害【hài】性【xìng】，必须在二级生物【wù】安全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意防【fáng】护【hù】，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：肾；肾细胞腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾透明细胞腺癌细胞 (786-0)运【yùn】输和保存：可【kě】选择干冰运输及发【fā】送复苏存活细胞方式：（1)干冰运输，收到后立即转入液氮冻存【cún】或【huò】直接复苏；（2)存活细【xì】胞，收到后【hòu】应【yīng】继续生长，传【chuán】代达到【dào】细胞生长【zhǎng】状态良好时【shí】，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞培养【yǎng】步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。