大鼠 MCAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MCAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室【shì】温，所有标准品和【hé】样品必需设置平行对【duì】照实验【yàn】，快【kuài】速加入试【shì】剂至样品中，立即【jí】漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘【pán】纸决定酶标条的使【shǐ】用量，将【jiāng】剩余的【de】酶标条连同干燥剂一起放【fàng】回【huí】密【mì】封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结【jié】合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性【xìng】）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔【kǒng】。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔【kǒng】板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时【shí】。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液【yè】400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一【yī】次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以确保没有【yǒu】洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物A和B需【xū】在临用前15分钟内等体【tǐ】积混【hún】合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标【biāo】仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的【de】光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果【guǒ】酶标仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔【kǒng】光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次【cì】使用试剂【jì】盒时，应将各种试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试剂【jì】，只是zui后加【jiā】底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样【yàng】品蒸【zhēng】发，试验时将反应板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或者【zhě】试剂，请于9-22℃保【bǎo】存，标准【zhǔn】品、生【shēng】物【wù】-素标记【jì】抗体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素【sù】工作液请依【yī】据所【suǒ】需的量配置【zhì】使用，请勿重复【fù】使【shǐ】用已稀【xī】释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作【zuò】液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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