大鼠β2GP1MELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 β2GP1M ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室温，所有标准【zhǔn】品和样品必需设【shè】置【zhì】平行对【duì】照【zhào】实验，快速加入【rù】试剂至样品中，立【lì】即【jí】漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实【shí】验键盘【pán】纸【zhǐ】决定酶标条的使用量，将剩【shèng】余的酶标【biāo】条连【lián】同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和【hé】液【yè】至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和【hé】NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一【yī】次洗涤，清【qīng】空【kōng】各微孔，在【zài】干净的【de】无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板【bǎn】数【shù】次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需【xū】在临用前15分钟内等【děng】体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果酶标仪不能自动清【qīng】除【chú】Blank(空白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各【gè】种【zhǒng】试剂管离心数分钟【zhōng】，以【yǐ】便试剂集中到【dào】管【guǎn】底。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为【wéi】空【kōng】白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将反【fǎn】应板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶标【biāo】板加上盖【gài】或覆【fù】膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或【huò】者试剂，请【qǐng】于9-22℃保存，标准品、生物【wù】-素标记抗体工作【zuò】液、辣【là】根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液请依据所需的量配【pèi】置使用【yòng】，请勿重复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生物【wù】-素【sù】标记【jì】抗体工作液或【huò】、辣根过氧化物酶【méi】标记【jì】亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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