大鼠8isoPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠8isoPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放【fàng】置30分【fèn】钟【zhōng】，平衡至室【shì】温，所有【yǒu】标准品和样【yàng】品必需设【shè】置平【píng】行对照实【shí】验，快速加入【rù】试剂至样品中，立即【jí】漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依【yī】据实【shí】验键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用量，将【jiāng】剩【shèng】余的酶【méi】标条连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液【yè】至【zhì】各个【gè】微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需【xū】拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干【gàn】净【jìng】的无尘吸水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色【sè】底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积【jī】混合，并【bìng】避【bì】光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密【mì】度值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正【zhèng】，如果酶【méi】标【biāo】仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次【cì】使用试剂盒时，应将各种【zhǒng】试剂【jì】管离心数【shù】分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空白调【diào】零孔，该【gāi】孔【kǒng】不【bú】加任何试剂，只【zhī】是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零【líng】。

3. 为【wéi】防【fáng】止【zhǐ】样【yàng】品【pǐn】蒸发，试【shì】验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶标板或者试剂，请于9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标记【jì】抗体工作液、辣根【gēn】过氧化物【wù】酶标【biāo】记亲【qīn】和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用，请勿重复使【shǐ】用【yòng】已稀释过【guò】的标准【zhǔn】品、生物-素标【biāo】记抗体【tǐ】工【gōng】作液或【huò】、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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