大鼠 GR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各【gè】种试剂【jì】取出放【fàng】置30分钟，平【píng】衡至室温，所有标准品和样品必【bì】需设置平【píng】行【háng】对照实验，快【kuài】速加入试剂至【zhì】样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标【biāo】条的使【shǐ】用量，将【jiāng】剩余的【de】酶标条连同【tóng】干燥剂一【yī】起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联【lián】酶至【zhì】各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体【tǐ】工作液【yè】至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔置于【yú】孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗【xǐ】3次【cì】，每次需拍干【gàn】。

11. 后一【yī】次【cì】洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数【shù】次【cì】，以【yǐ】确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在临用前【qián】15分钟内等体积【jī】混【hún】合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白【bái】）孔【kǒng】值，读取450nm处的【de】光密度值【zhí】，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如果酶标仪不能自【zì】动清【qīng】除Blank(空白【bái】)孔值，那么【me】手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以便试剂集中到【dào】管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作为空白【bái】调零孔，该孔不【bú】加任何试【shì】剂，只是【shì】zui后【hòu】加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺【pù】有【yǒu】湿布【bù】的密闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的【de】酶标板【bǎn】或者试【shì】剂，请【qǐng】于9-19℃保存，标准品、生【shēng】物【wù】-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液【yè】、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工【gōng】作【zuò】液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧化【huà】物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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