大鼠 TIEG1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 TIEG1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将各种试剂取【qǔ】出放【fàng】置30分钟，平衡【héng】至室温，所有标准品和样品必需设置【zhì】平行对照实验，快速加入试【shì】剂至样品中【zhōng】，立即漩【xuán】涡【wō】震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘【pán】纸决定酶标【biāo】条的【de】使用量，将剩余的酶【méi】标条连同干燥【zào】剂一【yī】起放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中【zhōng】和液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微【wēi】孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一【yī】次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以确保没有【yǒu】洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在临用【yòng】前15分钟内等【děng】体积混合【hé】，并避【bì】光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读【dú】取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空白【bái】)孔值，那【nà】么手动扣除每个【gè】读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用试剂盒时，应将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心数分【fèn】钟，以便试【shì】剂集【jí】中到管【guǎn】底。

2. 每次【cì】实验留一孔作【zuò】为空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零【líng】。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发【fā】，试【shì】验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于9-23℃保存【cún】，标【biāo】准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体工作液、辣根过【guò】氧化【huà】物酶标记【jì】亲和素工作【zuò】液请依据所需的量配置使【shǐ】用，请勿重复使【shǐ】用已【yǐ】稀【xī】释过的标【biāo】准品、生物【wù】-素标记抗体工【gōng】作液【yè】或、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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