大鼠 NTX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 NTX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂【jì】取出放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标【biāo】准品【pǐn】和样品必需设【shè】置平行对【duì】照实验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定酶标条的使用量，将【jiāng】剩余的【de】酶【méi】标【biāo】条【tiáo】连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将【jiāng】酶标【biāo】孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍【pāi】干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶【méi】标板【bǎn】数【shù】次【cì】，以确保没有【yǒu】洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶【róng】液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟内等体【tǐ】积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度【dù】值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有修【xiū】正，如果酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么【me】手动扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次使用试剂【jì】盒时，应【yīng】将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何【hé】试【shì】剂【jì】，只是zui后加底物溶【róng】液及【jí】2N H2SO4，测【cè】量时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放于【yú】铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭【bì】盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者【zhě】试剂【jì】，请【qǐng】于9-23℃保存，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标记抗体工作液、辣根过【guò】氧【yǎng】化物【wù】酶标记亲和素【sù】工【gōng】作液请依据【jù】所需【xū】的【de】量配【pèi】置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作液或、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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