寄生曲霉PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：寄生曲霉PCR检测试剂盒

英文名称：Aspergillus parasiticusPCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫【háo】升

染色液（t B）                                 微升【shēng】

稀释液（C）                                   毫【háo】升

溶【róng】解液（tD）                                  毫升

产【chǎn】品说【shuō】明书                                      1份

注意事项：

1．基础程序；

2．扩增温度和延伸温度；

3．反应时间；

4．循环次数；

5．PCR 反应液的配制；

6．PCR技术的基本原理；

7．PCR的反应动力学；

8．PCR扩增产物；

反应五要素：

参加【jiā】PCR反【fǎn】应的物质【zhì】主要有五种即引【yǐn】物、酶【méi】、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，寄生曲霉PCR检测试剂盒PCR 产物的特异【yì】性取【qǔ】决于引物与模板DNA互补的程【chéng】度【dù】。理论上，只要知道任【rèn】何一【yī】段模板DNA序列【liè】， 就【jiù】能按其设计互补的寡核苷酸【suān】链做【zuò】引物【wù】，利用PCR就可【kě】将模板DNA在体外【wài】大量扩增。设【shè】计引物应遵循以下原则【zé】：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜【yí】，特定条件下可【kě】扩增【zēng】长至【zhì】10kb的片【piàn】段【duàn】。

③引物碱基：G+C含量以9-21%为宜，G+C太少【shǎo】扩【kuò】增效果不佳，G+C过多易出现非【fēi】特【tè】异【yì】条带。ATGC*随机分【fèn】布，避免5个以上【shàng】的嘌呤【lìng】或嘧啶核苷酸的成串排【pái】列【liè】。

④避免引【yǐn】物内【nèi】部出现二级结【jié】构【gòu】，避免两条引物间【jiān】互【hù】补，特别是3'端的互【hù】补，否则会形成引物二聚体，产生非特异【yì】的扩增【zēng】条带。

⑤引物【wù】3'端的碱基，特【tè】别是【shì】末及倒数第二【èr】个碱基，应严格要求配对，以避免因末【mò】端碱基【jī】不配对而导致PCR失【shī】败。

⑥引物中【zhōng】有或能加上【shàng】合适的酶切位【wèi】点， 被【bèi】扩增的靶序【xù】列*有适宜【yí】的酶切位点， 这对酶切分【fèn】析或分子克【kè】隆【lóng】很有好处。

⑦引物的特异【yì】性：引物应【yīng】与核酸【suān】序【xù】列数据库的【de】其它序列无明显同【tóng】源性。

引物【wù】量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以【yǐ】*引物量【liàng】产生所需要的结果为【wéi】好，引物浓度【dù】偏高会【huì】引起错配和非【fēi】特异性扩增，且可【kě】增加引物之【zhī】间【jiān】形成【chéng】二聚体的机会。