产品时间:2024-9-21
我司产【chǎn】品弓形杆【gǎn】菌属通【tōng】用PCR检测【cè】试剂盒正品有保【bǎo】障,免费送【sòng】货上门,和各大【dà】快递公司都有合作,保证发【fā】货及【jí】时,运输无忧有质量问题【tí】,可随【suí】时免费包【bāo】退【tuì】换!我司全体员【yuán】工不断的为国内事业单【dān】位以及高校等提供的产品服务!本公【gōng】司具有质量可靠,灵敏度【dù】好,更有免【miǎn】费提供技术【shù】指导服务,欢【huān】迎【yíng】者来函洽谈!
产品介绍:
产品名称:弓形杆菌属通用PCR检测试剂盒
英文名称:Arcobacter spp.PCR
准备物品:
清【qīng】理液(A) 毫升
染色液【yè】(t B) 微升
稀释液【yè】(C) 毫升【shēng】
溶解液(tD) 毫【háo】升
产品说【shuō】明书 1份【fèn】
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素:
参加PCR反【fǎn】应的物质主要【yào】有【yǒu】五种即引物、酶、dNTP、模板【bǎn】和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,弓形杆菌属通用PCR检测试剂盒PCR 产物的【de】特【tè】异性取决于引物【wù】与模板DNA互补【bǔ】的程度。理【lǐ】论上,只【zhī】要知道任何一段模板DNA序【xù】列, 就能按其设计【jì】互补的【de】寡核苷酸链做【zuò】引物,利用PCR就可【kě】将模板DNA在体外大量扩增。设【shè】计引物【wù】应遵循以【yǐ】下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为【wéi】宜,特定条件下可【kě】扩增【zēng】长至【zhì】10kb的片【piàn】段。
③引物【wù】碱基【jī】:G+C含量以【yǐ】9-21%为宜,G+C太少扩增效果不佳【jiā】,G+C过多易出现【xiàn】非特异条带【dài】。ATGC*随机分布,避免5个以上【shàng】的嘌【piào】呤或嘧啶核【hé】苷酸的成【chéng】串排列。
④避【bì】免引物内部出现二级结构,避免【miǎn】两条引【yǐn】物间【jiān】互【hù】补【bǔ】,特【tè】别是3'端的互补【bǔ】,否则【zé】会形【xíng】成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的【de】碱基,特别是末及【jí】倒数第二个碱基,应【yīng】严格要【yào】求配对,以避免因末端【duān】碱基不配【pèi】对而【ér】导致PCR失败【bài】。
⑥引物【wù】中【zhōng】有或能加上【shàng】合适的酶切位点, 被扩增的靶序列【liè】*有适宜的酶切位点, 这【zhè】对酶切分【fèn】析或【huò】分子克隆很有好【hǎo】处。
⑦引物的特【tè】异性:引物【wù】应与【yǔ】核酸序列数据库的其它序列无【wú】明显同源性。
引物量:每条【tiáo】引物的【de】浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要【yào】的结果【guǒ】为好,引【yǐn】物浓度偏【piān】高会引起【qǐ】错配和非特异性【xìng】扩增,且可增加【jiā】引物之间形成二聚【jù】体的机会。
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