大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标【biāo】准品和【hé】样品必【bì】需设置平【píng】行对照实【shí】验【yàn】，快【kuài】速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的【de】使用量，将剩余的【de】酶标【biāo】条【tiáo】连同干燥剂【jì】一起放回密【mì】封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个【gè】微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作【zuò】液至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一【yī】次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干【gàn】净的无尘【chén】吸水纸【zhǐ】上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分钟内等体积【jī】混合【hé】，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每【měi】个【gè】读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂盒【hé】时，应将各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分【fèn】钟，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不【bú】加任何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时将反应【yīng】板放于铺【pù】有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板【bǎn】或【huò】者试剂，请于9-21℃保存，标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记抗体工作【zuò】液、辣【là】根过氧化物酶【méi】标记亲和素【sù】工作液请依据所需的量【liàng】配置【zhì】使用，请勿重复使用已【yǐ】稀释【shì】过的标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标记抗体【tǐ】工作液或【huò】、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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