大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准品和样【yàng】品必需【xū】设置平行对【duì】照实验，快速加入【rù】试剂至样品【pǐn】中，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用量，将剩余的【de】酶标条连同干【gàn】燥【zào】剂一起放回【huí】密封塑料袋【dài】，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液【yè】至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍【pāi】干微孔内溶【róng】液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清【qīng】空【kōng】各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标【biāo】板数次，以【yǐ】确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温【wēn】静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分钟【zhōng】内等【děng】体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标【biāo】仪Blank（空白）孔【kǒng】值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白【bái】)孔值【zhí】，那么手动扣除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂盒时，应将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心数分【fèn】钟，以【yǐ】便试剂集中到管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白【bái】调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时【shí】先用此【cǐ】孔调【diào】OD值至零【líng】。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的【de】密闭【bì】盒内【nèi】，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液、辣根过氧化【huà】物【wù】酶【méi】标记亲和素工作【zuò】液请依【yī】据所【suǒ】需的量配置使用【yòng】，请勿重复使用已【yǐ】稀释过【guò】的标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化【huà】物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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