产品时间:2024-9-22
大【dà】鼠u-T4 ELISA试【shì】剂盒(酶联免疫检【jiǎn】测法)由上海【hǎi】酶联生物提【tí】供【gòng】,包括u-T4 ELISA试剂盒说明书,酶联免疫检测试剂盒【hé】免费代测等产【chǎn】品【pǐn】详【xiáng】细介绍【shào】。
中文名称:大鼠 u-T4 ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)
产品规格:48T/96
产品存储:低温、避光保存
产品库存:现货供应
产品分类:酶联免疫试剂盒
产品用途:仅供检测,不得用于临床
发货方式:专门快递免费送货上门
实验步骤:
使用【yòng】前将各种【zhǒng】试剂取出放置30分钟【zhōng】,平衡至室【shì】温,所【suǒ】有标准品和样品必【bì】需设置平行对照实验,快速加【jiā】入试剂至【zhì】样品中,立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。
1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标【biāo】条【tiáo】的【de】使【shǐ】用量,将剩余的酶标条连【lián】同干燥剂一起放回密封塑【sù】料【liào】袋,密【mì】封,4℃保存。
2. 移取50μL中和液【yè】至各个微孔中【zhōng】,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。
3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔(0 pmol/mL cAMP标准品)。
4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。
5. 移取100μL样品至相应的孔。
6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】。
7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中,除了TA(全活性)孔【kǒng】和【hé】Blank(空白【bái】)孔。
8. 移取50μL 抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】至各孔中,除了TA(全活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔。
9. 将酶标孔【kǒng】置【zhì】于孔板【bǎn】振动器上,250~500rpm,室温【wēn】孵育【yù】2小时。
10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液,加【jiā】洗涤液400μL每【měi】孔【kǒng】洗3次,每次需拍【pāi】干。
11. 后一次洗【xǐ】涤【dí】,清空各微孔,在干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板【bǎn】数次【cì】,以确保没有【yǒu】洗【xǐ】涤液残【cán】留。
12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。
13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】,于室温静置5~30分钟。(显色【sè】底物A和【hé】B需在临用前15分钟内等体积【jī】混【hún】合,并避光【guāng】放置)。
14. 每孔加入50μL终止液,终止后立即读数。
15. 清除酶标仪【yí】Blank(空白)孔值【zhí】,读取450nm处的【de】光【guāng】密度值,在570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】,如果酶标仪不【bú】能自动清除Blank(空白【bái】)孔值【zhí】,那么手动【dòng】扣除每个读【dú】数的Blank(空白)孔光密【mì】度值。
注意事项:
1. 用【yòng】户【hù】在初次使用试剂盒时,应将【jiāng】各【gè】种试剂【jì】管离心数分钟,以便试剂集中【zhōng】到管底【dǐ】。
2. 每次【cì】实验留一孔【kǒng】作【zuò】为空白调零孔,该孔不加任何【hé】试剂,只是zui后【hòu】加底物溶【róng】液【yè】及2N H2SO4,测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应【yīng】板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内,酶标板加【jiā】上盖【gài】或【huò】覆膜。
4. 未使用【yòng】完的酶标【biāo】板或者试剂,请于9-22℃保【bǎo】存【cún】,标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液、辣根过氧【yǎng】化【huà】物【wù】酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作【zuò】液请依【yī】据所需的量配置使用【yòng】,请勿重【chóng】复使用已稀释【shì】过的标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液【yè】或、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素【sù】工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
大鼠 u-T4 ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)由上海酶联生物现货供应,包括u-T4 ELISA试剂盒【hé】、酶联免疫【yì】检测试剂盒说明书、实验原理【lǐ】、操【cāo】作步骤等【děng】产品【pǐn】详细介绍。
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