人葡萄球菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：人葡萄球菌PCR检测试剂盒

英文名称：Staphylococcus hominisPCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫【háo】升

染色液（t B）                                 微升

稀释液（C）                                   毫升【shēng】

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品说【shuō】明【míng】书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反【fǎn】应的物质主要有五种即引物【wù】、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关【guān】键，PCR 产【chǎn】物的特异性取决于引物与【yǔ】模板DNA互补的程度。人葡萄球菌PCR检测试剂盒理论【lùn】上，只要知道任何一【yī】段模板【bǎn】DNA序列， 就能按【àn】其【qí】设计互补的寡核苷酸链做引【yǐn】物，利【lì】用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外大量扩【kuò】增。设计引物应遵循以【yǐ】下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩【kuò】增【zēng】跨度： 以200-500bp为宜【yí】，特定条件下可扩【kuò】增长至10kb的片段。

③引物碱【jiǎn】基：G+C含量以9-21%为宜，G+C太少扩【kuò】增效果【guǒ】不佳，G+C过【guò】多易出现非特异条带【dài】。ATGC*随机分布，避免5个【gè】以上的嘌呤或嘧【mì】啶核苷酸的成串排列。

④避免引【yǐn】物内【nèi】部出现二级【jí】结【jié】构，避免两条引物间互补，特【tè】别是3'端的互【hù】补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的【de】扩增条带。

⑤引物3'端的【de】碱基【jī】，特别是末及倒数第【dì】二【èr】个碱基【jī】，应严格要求配【pèi】对，以避免因末【mò】端碱基不配对而【ér】导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适【shì】的【de】酶切【qiē】位点， 被扩增的【de】靶序【xù】列*有适宜【yí】的酶切位【wèi】点， 这对酶切分析或【huò】分子克【kè】隆很有【yǒu】好处。

⑦引物的特异【yì】性：引物应与核酸序【xù】列数据库的【de】其它序列【liè】无明显同【tóng】源性【xìng】。

引物量：每条引物的浓【nóng】度【dù】0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产【chǎn】生所需【xū】要的【de】结果为好【hǎo】，引【yǐn】物浓度偏高会引【yǐn】起错配和【hé】非【fēi】特异性扩增，且可增加引物【wù】之间形【xíng】成二聚【jù】体的机会。