小鼠 17β-E2 ELISA试剂盒（酶联检测法）

名  称： 小鼠 17β-E2 ELISA试剂盒（酶联检测法）

英　文： 17β-E2 ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法定量测【cè】定血清、血浆、细胞培养上清或其【qí】它【tā】相【xiàng】关生物液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不用的板【bǎn】条应立即放【fàng】回包装袋【dài】中，密【mì】封保存，以免变质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取终止【zhǐ】液和底物【wù】A、B液时，避【bì】免使用带金属部分的加样器【qì】。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品【pǐn】：标准品【pǐn】的系列稀释应在实【shí】验时准备，不能储【chǔ】存，稀释前将标准品振【zhèn】荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待【dài】测样品数量加上标准品的数量决定所【suǒ】需的板【bǎn】条数，每个标【biāo】准品和空白【bái】孔【kǒng】建议【yì】做复孔【kǒng】。

5)每【měi】个样品根据【jù】自己的数量来【lái】定【dìng】，能使用复孔的尽量【liàng】做复孔，标本用标本稀释液1:1稀释【shì】后加入50ul于反应孔内。

6)加【jiā】入稀【xī】释好后的【de】标【biāo】准品50ul于反应孔、加【jiā】入待测样品50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤【dí】液，振荡30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用【yòng】吸【xī】水纸拍干【gàn】，重复此操作【zuò】3次【cì】。

9)每孔加【jiā】入80ul的亲和链【liàn】酶素-HRP，轻【qīng】轻振荡【dàng】混匀【yún】，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔【kǒng】加满洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用【yòng】吸水纸拍干。重复【fù】此操【cāo】作3次【cì】。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育10分钟【zhōng】，避【bì】免光【guāng】照。

12)取出酶标【biāo】板，迅速【sù】加入50ul终止液，加入【rù】终止液后应【yīng】立即测【cè】定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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