小鼠 CollagenIV （酶联免疫检测法）

名  称：  小鼠 CollagenIV（酶联免疫检测法）

英　文： CollagenIV ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆【jiāng】、细【xì】胞培养【yǎng】上【shàng】清或其【qí】它相关生【shēng】物液【yè】体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用的【de】板条应立即【jí】放回包装袋中，密封保【bǎo】存，以免变【biàn】质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止【zhǐ】液和底物A、B液时，避【bì】免使用【yòng】带金属部分的加样【yàng】器【qì】。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品【pǐn】：标准品的【de】系【xì】列稀【xī】释应在实验时准备，不能【néng】储存，稀释前将标准品振荡混【hún】匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样【yàng】品数量加上标【biāo】准品的数量决【jué】定所需的板条数，每个【gè】标准品【pǐn】和空【kōng】白【bái】孔建议做复孔。

5)每个样品根据自己的数量来定，能【néng】使【shǐ】用复孔的尽量做复孔【kǒng】，标本用【yòng】标【biāo】本稀释液1:1稀释后【hòu】加入50ul于反应【yīng】孔内。

6)加入稀释好后【hòu】的标准品50ul于反应孔【kǒng】、加入待测样品【pǐn】50ul于反应孔内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩【shuǎi】去孔内液【yè】体【tǐ】，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸水纸拍干，重【chóng】复此操【cāo】作3次。

9)每孔加【jiā】入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分【fèn】钟。

10)甩去孔内液体【tǐ】，每孔加满洗【xǐ】涤液，振荡30秒【miǎo】，甩去【qù】洗涤液，用吸【xī】水【shuǐ】纸拍干。重【chóng】复此操作3次。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混【hún】匀【yún】，37℃温育10分钟，避免光【guāng】照。

12)取出【chū】酶标板，迅速加【jiā】入50ul终止液，加入终止液【yè】后应立即【jí】测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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