小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

名  称： 小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

英　文： ESelectin ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期【qī】应用：ELISA法定量测定血清【qīng】、血浆【jiāng】、细胞培养【yǎng】上清或其它相关生物【wù】液【yè】体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不用的板【bǎn】条应立即放回包装袋中，密封保存【cún】，以免【miǎn】变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和底物A、B液时【shí】，避【bì】免【miǎn】使用带金属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准品的系列稀释应在【zài】实验时准【zhǔn】备，不能储存，稀释前将【jiāng】标准品【pǐn】振荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待测样品【pǐn】数【shù】量加上标【biāo】准品的【de】数量【liàng】决定所需的板条数，每个标准【zhǔn】品和空【kōng】白孔建议做复孔。

5)每个样品根据自己的数量来定【dìng】，能使【shǐ】用复孔的尽【jìn】量做复孔，标【biāo】本【běn】用标本稀释液1:1稀释【shì】后加【jiā】入50ul于反应【yīng】孔内。

6)加入【rù】稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样【yàng】品50ul于反应【yīng】孔【kǒng】内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满【mǎn】洗涤液【yè】，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸水纸拍干，重复此【cǐ】操【cāo】作3次【cì】。

9)每孔加入80ul的亲【qīn】和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩【shuǎi】去孔【kǒng】内液体，每【měi】孔加满洗【xǐ】涤液【yè】，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸【zhǐ】拍干。重复【fù】此操作3次。

11)每孔加【jiā】入【rù】底物A、B各50ul，轻轻振【zhèn】荡混匀，37℃温育10分钟，避免光照【zhào】。

12)取出酶标板，迅速加入50ul终止液【yè】，加入终止液【yè】后【hòu】应【yīng】立即测定结【jié】果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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