大鼠胰岛0细胞瘤细胞（RIN-m5F）

大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)
细胞介绍
该细胞【bāo】是大鼠胰岛细胞RIN-m的克隆，分泌胰【yí】岛【dǎo】素及L型多巴脱【tuō】羧酶，不产【chǎn】生【shēng】生长激素【sù】抑制激素。
 
细胞特性
1)来源：大鼠，胰岛
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用T25瓶充【chōng】液发送活细胞。收【shōu】到【dào】细胞后，请先在显微镜下检查细胞生【shēng】长状态，并【bìng】将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后，再次检【jiǎn】查细【xì】胞状态【tài】。若【ruò】状态良【liáng】好，可进【jìn】行细胞后续处理操作，按照【zhào】以下【xià】方式进行。若发现【xiàn】可疑污【wū】染物，请及【jí】时与我们取得电联。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO，添加 NaHC031.5g八,D-葡萄糖【táng】2.5g八【bā】，丙酮酸钠【nà】O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管【guǎn】在37°C水浴中【zhōng】迅速摇晃【huǎng】解【jiě】冻，加入4mL培养基【jī】混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养基【jī】后吹【chuī】匀。然后将所有【yǒu】细【xì】胞悬液加入培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜（或将
细【xì】胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养【yǎng】过夜）。第二【èr】天【tiān】换液并【bìng】检查细胞密度【dù】。
 
细胞传【chuán】代：如果细胞密【mì】度达80%-90%，即可进行传代培养【yǎng】。弃去培养上【shàng】清，用不含【hán】钙、镁离【lí】子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消化情【qíng】况【kuàng】，若【ruò】细胞大【dà】部分变【biàn】圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几下培【péi】养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培养液【yè】后吹匀【yún】。 将细胞【bāo】悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿【mǐn】中或者【zhě】瓶中。
 
细胞冻【dòng】存：待【dài】细胞生长状态良好时，可【kě】进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存【cún】时【shí】，弃去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入【rù】约lml含血清【qīng】的【de】培【péi】养基后【hòu】加入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进【jìn】行冻存。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发【fā】干净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电联。所有动物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害【hài】性，必须在【zài】二级生物安全【quán】台【tái】内操作，并请【qǐng】注【zhù】意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。