上【shàng】海酶联【lián】生物细胞培养需要哪些环【huán】境【jìng】因素，随着【zhe】近几年生物、生命科学的发展，生【shēng】物试剂【jì】的供应商【shāng】也越来越多，细胞株作为【wéi】国内生物试剂【jì】和消耗【hào】品的企【qǐ】业，上海酶联生【shēng】物有限公司不仅见证了行业的发展【zhǎn】，逆流而【ér】上，扬帆远航【háng】。

1．无菌环境

无毒和无【wú】菌是体外【wài】培养细【xì】胞的首【shǒu】要条【tiáo】件。细胞在活体【tǐ】内【nèi】，解毒系统【tǒng】和【hé】免疫系统可抵抗微生物或其他【tā】有【yǒu】害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺【quē】乏【fá】机体免疫系统的保护而丧失对微【wēi】生物的防御能力和对有害物【wù】质的解毒能【néng】力。为保证【zhèng】细胞能在体外环境中生长繁殖，必【bì】须【xū】要【yào】确保无菌工【gōng】作区域、良好的个人【rén】卫生、无菌试剂和培养基【jī】以及无【wú】菌【jun1】操作。

常【cháng】见的【de】微生物【wù】污染【rǎn】有支原体【tǐ】、细【xì】菌【jun1】、真【zhēn】菌。支原体【tǐ】无致死毒性，可【kě】与【yǔ】细胞长期共存，对细【xì】胞有潜在【zài】影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快，在短时间【jiān】内即可大量【liàng】扩增，并产生毒素杀死【sǐ】细胞。真菌的种类繁多，肉眼【yǎn】可见，漂浮于培养液面【miàn】上【shàng】，可呈丝状、管状或树枝状【zhuàng】等【děng】。

2.合适的温度

一般哺乳类【lèi】与禽类细胞在体外培养的适宜温度【dù】是【shì】37～38℃，不适宜【yí】的环境温度会影【yǐng】响细胞的【de】生长。细胞【bāo】对低温的耐【nài】受能力要强于对高【gāo】温的耐受【shòu】能力【lì】，在【zài】低温【wēn】下，细胞的代谢活力及核分【fèn】裂【liè】能力降低。若温度【dù】不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤【shāng】作用；25～35℃时，细胞【bāo】以缓慢的速【sù】度生长【zhǎng】；但【dàn】若被置于【yú】40℃数小时，则不仅不利于细胞【bāo】生存、生长，甚至【zhì】可导致其死亡。

3．气体环境与pH

细胞的体外培养需要理【lǐ】想的气体环境，氧气【qì】、二氧化【huà】碳是细【xì】胞生存的必【bì】要条件。氧气参与细胞【bāo】的三【sān】羧酸循环【huán】，为细胞生存、代谢【xiè】与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢【xiè】产物，是细胞生长的必需【xū】成分，又与维【wéi】持培养液的pH有关。大多【duō】数【shù】细【xì】胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放【fàng】式培养中【zhōng】，以5%的【de】二【èr】氧【yǎng】化【huà】碳气体比例为宜【yí】。 

4.适宜的渗透压

高渗溶液或低【dī】渗溶液会引【yǐn】起细胞发生褶皱、肿胀【zhàng】、破裂【liè】。因此【cǐ】，渗透【tòu】压是体外培养细【xì】胞的重要条【tiáo】件之一。多数【shù】体外培养的细胞对渗透压【yā】都有【yǒu】一定的耐【nài】受能力【lì】，实【shí】际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于【yú】大多数细胞。

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