大鼠糖原合成酶(GS)酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T

8U/L - 240U/L

使用目的：

本试剂盒用于测定大鼠【shǔ】血清、血浆及相关液体样本【běn】中【zhōng】糖原合成酶（GS)活【huó】性。

实验原理：
本试剂【jì】盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠糖原【yuán】合成【chéng】酶（GS)合成酶（GS)抗体【tǐ】包【bāo】被微【wēi】孔板，制成固相抗体【tǐ】，往包被单抗的微【wēi】孔中依次【cì】加【jiā】入糖原合成酶（GS)，再与 HRP 标【biāo】记的【de】糖原合成【chéng】酶【méi】（GS)抗体    ，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经【jīng】

。TMB在   HRP酶的催化下转化成蓝色，并【bìng】在酸的【de】作用【yòng】下转【zhuǎn】化成终的。颜色【sè】的深浅【qiǎn】和样品中的【de】糖【táng】原【yuán】合成酶（GS)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测【cè】定吸光【guāng】度（OD值），通过标准曲线【xiàn】计算样品中大【dà】鼠糖【táng】原合成酶（GS)活性浓度【dù】。

试剂盒组成：

标本要：

1．标【biāo】本采集后【hòu】尽早进行提取，提取按相关文献进行【háng】，提取【qǔ】后【hòu】应尽快【kuài】进行实验。若不【bú】能马上【shàng】进行【háng】试【shì】验，可将标本放于-20℃保存【cún】，但应避【bì】免反复冻融

2．不能检测含NaN3的【de】样品，因   NaN3抑【yì】制辣根过（HRP）活性。

操作步骤：

1.  标准品的稀释：本【běn】试【shì】剂盒提供原倍标准品一【yī】支【zhī】，用户【hù】可按照下列图表在小试管【guǎn】中进行稀释。

2.  加样：分别设空白孔【kǒng】（空白对照孔不【bú】加样品及酶标试剂，其【qí】余各步操【cāo】作【zuò】相【xiàng】同）、标准孔【kǒng】、待测样【yàng】品孔【kǒng】。在酶【méi】标包被【bèi】板上【shàng】标准品准确加样 50µl，待测样品【pǐn】孔中先加样品稀释液 40µl，然后再【zài】加待测样品 10µl（样品zui终稀释度【dù】为 5倍）。加样将样品加【jiā】于酶标【biāo】板孔底【dǐ】部，尽量不触【chù】及孔【kǒng】壁，轻【qīng】轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后 37℃温育30分钟。

4.配液：将 30倍浓    30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃【qì】去液体，甩干【gàn】，每孔加【jiā】满洗涤【dí】液【yè】，静重复 5次，30秒【miǎo】后弃去，如此 拍干【gàn】。

6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。

7.温育：操作同 3。

8.洗涤：操作同 5。

9.显色：每孔先加入显【xiǎn】色剂 A50µl，再加入显色【sè】剂【jì】 B50µl，轻轻震【zhèn】荡混匀【yún】，37℃避光显色【sè】10分钟.

10.终止：每孔加终止【zhǐ】液    50µl，终止反应（此时蓝色【sè】立【lì】转）。

11.测定：以空白空调零，450nm波【bō】长依序【xù】测量【liàng】各孔的吸光度（OD 值）。测定应【yīng】在加【jiā】终【zhōng】止液后【hòu】 15分钟以内进行【háng】。

大鼠糖原合成酶(GS)酶联免疫分析试剂盒操作程序总：

计算：

以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标【biāo】，在坐标【biāo】纸上，根据样品的OD值由【yóu】标【biāo】准曲线查出相【xiàng】应的【de】浓度；再乘以稀释【shì】倍数；或【huò】用标【biāo】准物的浓度与  OD值【zhí】计算出【chū】标【biāo】准曲线的【de】直线回归【guī】方程式，将样品【pǐn】的 OD值【zhí】代入方程式【shì】，计算出【chū】样品【pǐn】浓度，再【zài】乘【chéng】以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项：

1．试剂盒从冷藏环境中【zhōng】取出应在室温平【píng】衡 9-22分钟【zhōng】后方可使用，酶标【biāo】包被【bèi】板开封后如【rú】未【wèi】用完，板条应装入密封袋中保存【cún】。

2．浓洗涤液【yè】可能会有【yǒu】析出，稀释时可在【zài】浴中加温助溶【róng】，洗涤时不影响。

3．各【gè】步加样均应使用加样器，并经常校对其【qí】准确【què】性，以避免试验误差。一次加样时间好【hǎo】控制在 5分钟【zhōng】内，如标本数量多，推荐【jiàn】使用排枪【qiāng】加样。

4．请【qǐng】每次测定的同时做标准【zhǔn】曲线，好做复孔。如标本【běn】中待测物质含量【liàng】过高（样本  OD值大于【yú】标准品孔孔的【de】 OD值），请【qǐng】先用样【yàng】品稀释液稀【xī】释一定【dìng】倍数（n倍）后再测【cè】定，计算时请后乘【chéng】以总【zǒng】稀释倍【bèi】数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

大鼠糖原合成酶(GS)酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期：

1．试剂盒保存：9-22℃。

2．有效期：6个月