仓鼠白细胞介素-6（IL-6）酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T

3pg/ml-120pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定【dìng】仓鼠【shǔ】血清【qīng】、血浆及相关液体样本【běn】中白细胞介素【sù】-6（IL-6）含【hán】量。

实验原理

本试剂盒【hé】应用双抗体夹【jiá】心法【fǎ】测【cè】定【dìng】标【biāo】本中仓鼠白细胞介素【sù】-6（IL-6）水平【píng】。用纯化的仓鼠白细胞【bāo】介素-6（IL-6）抗【kàng】体包被【bèi】微孔板，制成固相抗体，往包被单抗【kàng】的微孔【kǒng】中依次加【jiā】入【rù】白细胞介素-6（IL-6），再与HRP标记的白细胞介素-6（IL-6）抗体结【jié】合，形成抗体-抗原-酶【méi】标抗【kàng】体复【fù】合物，经过*洗涤后加【jiā】底物TMB显色【sè】。TMB在HRP酶【méi】的催化【huà】下转化成蓝色【sè】，并在酸的作用下转化成终的【de】。颜色的深【shēn】浅和样品中的白细胞介素-6（IL-6）呈正相【xiàng】关【guān】。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度【dù】（OD值），通过标准曲线计算样【yàng】品中仓鼠白细胞介素-6（IL-6）浓度。 

仓鼠白细胞介素-6（IL-6）酶联免疫分析试剂盒组成 

标本要求 

1．标本采集后【hòu】尽早【zǎo】进行提【tí】取【qǔ】，提取按【àn】相关文献进行，提取后应尽快进【jìn】行实验【yàn】。若不能马上进行试验，可将标本【běn】放于-20℃保存，但【dàn】应避免反【fǎn】复冻融

2．不能检测含NaN3的【de】样品【pǐn】，因NaN3抑制辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶【méi】的（HRP）活【huó】性。

操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支【zhī】，用户可按照【zhào】下列图表在小试【shì】管中【zhōng】进行【háng】稀释。

2.加样：分别设空白孔（空【kōng】白对照【zhào】孔不加样品及酶【méi】标试剂，其【qí】余各步操作相同【tóng】）、标准孔、待测样【yàng】品孔。在酶标包被板上标准品【pǐn】准确加样50μl，待测【cè】样品孔中【zhōng】先加样品【pǐn】稀释液40μl，然【rán】后再加待测样【yàng】品10μl（样品终稀释度【dù】为5倍）。加样将样品加于酶标板孔【kǒng】底部，尽量不【bú】触及孔【kǒng】壁【bì】，轻轻【qīng】晃动混匀。

3.温育：用封板【bǎn】膜封板【bǎn】后置37℃温育30分【fèn】钟。   

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小【xiǎo】心揭掉封板膜，弃去液体，甩干【gàn】，每孔加【jiā】满洗【xǐ】涤液，静【jìng】置30秒后弃去，如此重复5次，拍【pāi】干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色【sè】剂【jì】A50μl，再加入显【xiǎn】色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避【bì】光显【xiǎn】色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。

11.测定：以空白空【kōng】调零【líng】，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终【zhōng】止【zhǐ】液后15分钟以【yǐ】内【nèi】进行。

仓鼠白细胞介素-6（IL-6）酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：

计算

  以【yǐ】标准【zhǔn】物的【de】浓度为横坐【zuò】标，OD值【zhí】为纵坐【zuò】标，在【zài】坐标纸上【shàng】绘出标【biāo】准【zhǔn】曲线【xiàn】，根据样品的OD值【zhí】由标准曲【qǔ】线查出相应的【de】浓【nóng】度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲【qǔ】线【xiàn】的直线【xiàn】回归方程式，将样品的【de】OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度【dù】。 

注意事项

1．仓鼠白细胞介素-6（IL-6）酶联免疫分析试剂盒从冷藏环境中取出应在【zài】室温平衡9-22分钟【zhōng】后方【fāng】可【kě】使用，酶标【biāo】包被板开【kāi】封后如未【wèi】用完，板条应装入密【mì】封袋中保【bǎo】存。

2．浓洗涤【dí】液可能会有结晶析出，稀【xī】释时【shí】可在水浴中加温助溶【róng】，洗涤【dí】时不影响结【jié】果。

3．各【gè】步加样均应使用加【jiā】样器，并【bìng】经常校对其准确性【xìng】，以避免试验误差【chà】。一次【cì】加样【yàng】时间好控制在5分钟内，如标本【běn】数量多，推荐使用排【pái】枪加样。

4．请每次【cì】测定的同【tóng】时做标准曲线【xiàn】，好做复孔【kǒng】。如【rú】标本中待测物质【zhì】含量过【guò】高（样本OD值大于标准品孔孔【kǒng】的OD值），请【qǐng】先用样品稀释液稀释一定倍【bèi】数（n倍）后再测定【dìng】，计算时请后【hòu】乘以总【zǒng】稀【xī】释倍数【shù】（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进【jìn】行【háng】，试验结【jié】果判定必须以酶【méi】标【biāo】仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：9-22℃。

2．有效期：6个月