目前市场上的ELISA试剂盒质量参【cān】差不齐，如何去挑【tiāo】选【xuǎn】适合自己的试剂【jì】盒就显得特别重要，主要【yào】参考【kǎo】以下四【sì】个因素：

一、检测方式
如今检测ELISA试剂盒有许多途径，我们可以根据自己的偏【piān】好进【jìn】行【háng】选择。一般ELISA检测【cè】的是酶促反应的可溶性产物，抗体上结【jié】合有相【xiàng】应的酶，而反应体系中添加有相【xiàng】应的底物。这种酶【méi】促反应具【jù】有【yǒu】特征性的颜【yán】色【sè】，可以【yǐ】通过【guò】分【fèn】光光度计进行检【jiǎn】测，碱性磷酸酶ap也是一种常用酶【méi】。酶可【kě】以结合在一抗上【shàng】，也可以【yǐ】结合在【zài】二抗上【shàng】，还可以使【shǐ】用链霉【méi】亲和【hé】素标记【jì】的酶【méi】与亲和【hé】素【sù】标记的一抗结合。此外ELISA结果检测还包【bāo】括【kuò】放【fàng】射性检测、荧光【guāng】检测、化学发光或显色法检测等。

二、实验类型
虽【suī】然有多种【zhǒng】类型，不过它们【men】都有一个共同特点，就是进行抗原捕【bǔ】获。一般捕获【huò】形式包括将抗原吸附到微孔【kǒng】板或者【zhě】用微孔板上【shàng】的抗体进行捕获。in-cell Elisa和酶联免疫斑点elispot是两种特殊【shū】的类型，in-cell Elisa需要将微孔【kǒng】板中培养的细胞进【jìn】行固定和通【tōng】透化，然【rán】后再用抗体原【yuán】位检测。elispot有【yǒu】点【diǎn】像蛋白印迹western blot，先在带膜【mó】的微【wēi】孔板【bǎn】中培【péi】养细【xì】胞【bāo】，然后在膜上检测【cè】细【xì】胞分泌的【de】抗原形成【chéng】斑点【diǎn】。此外，我们还需要根据自身需要选择96孔【kǒng】板【bǎn】或【huò】是48孔【kǒng】板进行Elisa实验。

三、抗体类型
单克【kè】隆抗体和多克隆【lóng】抗体都【dōu】能【néng】够用于Elisa检【jiǎn】测，实际上有【yǒu】时候二者结合效果更好。例如，对于双抗夹心法而言，用多抗进行捕【bǔ】获而单抗进行检测有【yǒu】时更有【yǒu】帮助。多【duō】抗能【néng】够确保捕获所【suǒ】有抗【kàng】原【yuán】，随后单抗再特异性检测【cè】拥有特定抗【kàng】原表位的抗原【yuán】。

四、交叉反应
如果【guǒ】抗【kàng】体【tǐ】间发【fā】生冲突或交叉【chā】反应【yīng】就会影响整个实验的特异性【xìng】。其中【zhōng】抗体【tǐ】来【lái】源所带来的兼容性【xìng】就是【shì】交【jiāo】叉反应的【de】一【yī】个因素。尽管现在购买【mǎi】源自zhi定动物的抗【kàng】体越来越容易，我们仍有必要确认一下是否会产【chǎn】生交叉反应的问【wèn】题。在用【yòng】双【shuāng】抗夹心法进行【háng】Elisa检测时，检测用的二抗必须特异【yì】性针对检【jiǎn】测【cè】一抗，而不能【néng】与捕【bǔ】获抗体起反应。如果检测用【yòng】二抗与捕获【huò】抗体结合，实验特【tè】异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同【tóng】宿【xiǔ】主的捕获抗体和【hé】检测一抗，来避免上述问题。

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